Contact us | Chinese | English
Products
Location : Home - Products

Recombinant Protein A Sepharose Fast Flow

Product Name: Recombinant Protein A Sepharose Fast Flow (rProtein A Sepharose FF) 

Catalog Number: NRPB01L, NRPB01S (prepacked column)

Packing Details: 20 ml, 100 ml, 1L, 1 ml (prepacked column), 5ml (prepacked column),           

10ml (prepacked column)

Introduction:

Protein A is a cell wall protein of Staphylococcus aureus and contains five functional 

domains that can bind to the Fc fragment of IgG. As an affinity ligand, protein A is 

conjugated to Sepharose and its functional domains are available for binding IgG. 

One molecule of conjugated protein A can bind at least two molecules of IgG.

Column Characteristics

Support

6% highly cross-linked spherical agarose

Ligand

Recombinant protein A

Ligand Density

6 mg/ml

Particle Size

45~165 μm

Maximum Flow Rate

750 cm/h

Recommended Linear Flow Rate

100 cm/h

Work (Cleaning) pH Value

3~9 (3~10)

Maximum Operating Pressure

0.3 MPa

Capacity

35 mg IgG /ml 

Storage

4 oC to 8 oC in 20% ethanol

 

Some typical binding and elution conditions with protein A sepharose

Species

Antibody Class

Protein A binding

pH value of binding buffer

pH value of elution buffer

Human

IgG1

++

6.0~7.0

3.5~4.5

IgG2

++

6.0~7.0

3.5~4.5

IgG3

-

8.0~9.0

7.0

IgG4

++

7.0~8.0

2.5~4.5

Cow

IgG2

++

 

2

Goat

IgG2

+

 

5.8

Mouse

IgG1

+

8.0~9.0

5.5~7.5

IgG2a

+

7.0~8.0

4.5~5.5

IgG2b

+

7.0

3.5~4.5

IgG3

+

7.0

4.0~7.0

Rat

IgG1

+

9.0

7.0~8.0

IgG2a

-

9.0

8.0

IgG2b

-

9.0

8.0

IgG3

+

8.0~9.0

3.0~4.0

Rabbit

no distinction

++++

7.4

3.0~4.0

??nbsp;represents the binding strength

 

Performing a separation

Binding buffer: 20 mM sodium phosphate, 150 mM NaCl, pH 7.4

Elution buffer: 100 mM sodium citrate, pH 4.0

Neutralization buffer: 1M Tris-HCl, pH 9.0

1) Wash the prepacked 1 ml column with 5~10 column volumes of distilled water to remove 20% ethanol.

2) Equilibrate the column with 5~10 column volumes of binding buffer.

3) Dilute 5 ml rabbit serum with binding buffer to 50 ml. Filtrate the diluted serum through a 0.45 μm filter and load the sample.

4) Wash the column with 10 column volumes of binding buffer.

5) Elute the column with 5 column volumes of elution buffer and neutralize collect fractions with neutralization buffer.

6) After each separation cycle, regenerate the resin by washing with approximately 3~5 column volumes of 0.1 M citrate buffer (pH 3.0).

7Measure the purity of the collected antibody by SDS-PAGE analysis (Figure 1, >95% purity).

 

HangZhou NeuroPeptide Biological Science and Technology Incorporation, Limited. All Rights Reserved.
TEL:0571-82872376 FAX:0571-82872372