NRPB10L STI-琼脂糖凝胶FF

相关介绍： 

STI-琼脂糖凝胶FF是一种将大豆胰蛋白酶抑制剂（STI）键合在琼脂糖凝胶微球上形成的生物亲和层析分离介质。该产品保留了琼脂糖极好的亲水性及大网架结构，与生物活性大分子有很好的相容性，具有载量高，非特异性吸附少，流速快等特点，主要用于胰蛋白酶、糜蛋白酶、凝血X因子等丝氨酸蛋白酶的提取和纯化，也可以用于肠激酶的去除。

技术指标：

使用方法：

　　1. 装柱

　　1.1 根据分离目标性质配制初始缓冲液（平衡液）和洗脱缓冲液。

　　1.2 将凝胶抽干，并用蒸馏水洗涤2次去除保存的乙醇，用蒸馏水配成匀浆并脱气。

　　1.3 将层析柱垂直固定，底端用水或缓冲液润湿并保持一段液位。

　　1.4 用玻璃棒引导匀浆沿着柱内壁一次性倒入柱内，使凝胶在柱内自由沉降。

　　1.5 连结好柱子顶端活动柱头，打开蠕动泵，让缓冲液用使用时操作流速流过5柱体积，再使用1.5倍的操作流速流过5个柱体积，调节适配柱头，使其尽量贴近胶面，最后用2 ~ 3倍柱体积的缓冲液平衡柱子。

注意：

1)所有操作过程不能引入气泡，保证装胶的均匀度。

2)如无条件做1.2，填料层有气泡，可进行2次装柱，去除保存的乙醇和气泡。

3)乙醇等试剂配制的溶液需要脱气。

　　2. 平衡

　　将平衡缓冲液以操作流速平衡层析柱，观察检测器的变化，直到UV、pH等参数不变。推荐的平衡缓冲液为：50 mM Tris-HCl，500 mM NaCl，pH 8.0。

　　3. 上样

　　切换转换阀进行上样，上样量根据样品的性质和层析介质的量进行选择，也可进行线性实验找到最佳上样量；样品的预处理：置换缓冲液，澄清过滤（0.45、0.22 μm）等。

　　4. 冲洗

　　用2 ~ 3个柱体积的平衡缓冲液冲洗上样后的层析柱，观察检测器的变化，直到UV、pH等参数不变。

　　5. 洗脱

　　一般用酸性缓冲液进行洗脱。推荐的洗脱缓冲液为：100 mM Glycine-HCl，500 mM NaCl，pH 3.0。洗脱后的样品应尽快调节至中性，比如加入1/10体积的2 M Tris-HCl (pH 8.0)。

　　6. 清洗

　　可以用平衡缓冲液和洗脱缓冲液反复清洗，本填料的活性基团为蛋白质，不能耐受强酸、强碱、强有机溶剂的清洗。

导购指南