品 名:蛋白A/G琼脂糖凝胶FF
英文名:Protein A/G NUPharose Fast Flow, Protein AG NUPharose FF
目录号:NRPB13L、NRPB13S(预装柱)
规 格:10 mL, 20 mL,50 mL, 100 mL,500 mL, 1 L,10 L, 1 mL预装柱,5 mL预装柱,特殊规格订制
运 输:2 ~ 25℃,常压、避光
贮 存:20%乙醇,2 ~ 8℃
保质期:3年
相关介绍:
蛋白A蛋白G琼脂糖凝胶FF是将重组蛋白A蛋白G融合蛋白(r-PAG,NRPA14S)键合在琼脂糖凝胶微球上形成的亲和分离介质。与单独的蛋白A或蛋白G分离介质相比,具有更宽广的结合范围,可以与人的所有IgG亚型、IgA、IgE、IgM结合,但不能与小鼠的IgA、IgM和血清白蛋白结合,适合用于鼠IgG单抗的提取和检测。同时融合后的r-PAG降低对pH的依赖,允许在pH5 ~ 8进行结合。
技术指标:
基质 | 4%交联琼脂糖 |
配基 | 蛋白A蛋白G融合蛋白 |
配基密度 | ≥6 mg/ml |
平均粒径 | ~90 μm |
最大流速 | 800 cm/h |
推荐流速 | 20~100 cm/h |
pH稳定性 | pH 3~9,pH2~10(清洗) |
耐反压 | 0.3 MPa |
载量 | ≥ 20 mg/ml IgG |
保存条件 | 2~8℃保存于20%乙醇溶液中 |
应用举例:
结合缓冲液:20 mM磷酸缓冲液,150 mM NaCl,pH 7.4
洗脱缓冲液:0.1 M Glycine-HCl缓冲液,pH 2.5
中和缓冲液:1 M Tris-HCl,pH 9.0
1)1 ml蛋白A蛋白G琼脂糖凝胶FF预填柱用5 ~ 10个柱床体积的蒸馏水洗去保存液;
2)用结合缓冲液结合缓冲液平衡 5 ~ 10个柱床体积;
3)将3 ml兔多抗血清用结合缓冲液稀释到15 ml,0.45 μm滤膜过滤上样;
4)用结合缓冲液再洗 5 ~ 10个柱床体积;
5)用洗脱缓冲液洗脱抗体,收集洗脱峰,并用中和缓冲液调节其pH至中性;
6)目的抗体洗脱后用结合缓冲液清洗5 ~ 10个柱体积平衡柱子;
7)分析洗脱下来的兔多抗。
种类 Species | 亚型 Antibody Class | 蛋白A Protein A | 蛋白G Protein G | 蛋白A蛋白G融合蛋白 Protein AG |
人 Human | IgG1 IgG2 IgG3 IgG4 IgM IgD IgA Fab | +++ +++ + +++ + - + + | +++ +++ +++ +++ - - - + | +++ +++ +++ +++ + - + + |
小鼠 Mouse | IgG1 IgG2a IgG2b IgG3 IgM | + +++ +++ +++ - | ++ +++ +++ +++ - | ++ +++ +++ +++ - |
大鼠 Rat | IgG1 IgG2a IgG2b IgG2c | + - - +++ | ++ +++ + +++ | ++ +++ + +++ |
牛 Cow | IgG1 IgG2 | + +++ | +++ +++ | +++ +++ |
山羊 Goat | IgG1 IgG2 | + +++ | +++ +++ | +++ +++ |
马 Horse | IgG(ab) IgG(c) IgG(T) | + + - | - - +++ | + + +++ |
兔Rabbit | IgG | +++ | +++ | +++ |
猪Pig | IgG | +++ | + | +++ |
狗Dog | IgG | +++ | + | +++ |
鸡Chicken | IgY | - | - | - |
注:-表示不结合;+表示微弱结合;++表示中等结合;+++表示很强结合。
注意事项:
1)预填柱使用简易方便,在没有仪器设备的条件下也可以完成纯化任务;
2)样品洗脱后一般pH很低,应立刻用碱性中和缓冲液(如1 M Tris-HCl,pH 9.0)将收集到的抗体溶液中和到中性,或在收集容器中事先装5% ~ 10%、pH 7.5的缓冲液(如1 M Tris-HCl或1 M 磷酸缓冲液),以利于维持抗体的生物活性,避免抗体失活;
3)使用时保证柱子和缓冲液的温度一致,避免柱床内产生气泡,如果已经产生气泡,可以自行重装柱子;
4)多次使用后会有沉淀蛋白,强疏水性蛋白,脂蛋白,脂质体等非特异吸附凝胶上,可以用0.1 %去垢剂短时间清洗,如0.1% Triton X-100清洗2个柱体积,立即用结合缓冲液洗5 ~ 10个柱体积。也可以用70%乙醇清洗作同样清洗。
5)
推荐流速 | |||
预装柱体积(ml) | 1 ml | 5 ml | 10 ml |
流速(ml /min ) | 0.2 | 1 | 2 |
导购指南
中文名 | 英文简称 | 货号 | 规格 | 产品描述 |
重力预装柱 | ||||
蛋白A/G琼脂糖凝胶FF重力预装柱 | PAG NUPharose FF pre-packed column | NRPB13S-Z11 | 1*1mL | 1支*1ml |
NRPB13S-Z41 | 4*1mL | 4支*1ml | ||
NRPB13S-Z15 | 1*5mL | 1支*5mL | ||
NRPB13S-Z25 | 2*5mL | 2支*5mL | ||
AKTA中压预装柱 | ||||
蛋白A/G琼脂糖凝胶FF中压预装柱 | PAG NUPharose FF pre-packed column | NRPB13S-Y11 | 1*1mL | 1支*1ml |
NRPB13S-Y41 | 4*1mL | 4支*1ml | ||
NRPB13S-Y15 | 1*5mL | 1支*5mL | ||
NRPB13S-Y25 | 2*5mL | 2支*5mL | ||
填料 | ||||
蛋白A/G琼脂糖凝胶FF | PAG NUPharose FF | NRPB13L-10 | 10mL | 1瓶*10ml |
NRPB13L-20 | 20mL | 1瓶*20ml | ||
NRPB13L-100 | 100mL | 1瓶*100ml | ||
NRPB13L-500 | 500ml | 1瓶*500ml | ||
注:纽龙生物填料体积为实际琼脂糖凝胶体积 |